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当前位置: 首页 > 产品中心 > Cloned_Genes > Excellgen/ExcellScript M-MLV(MMLV)逆转录酶RNase H-minus/EG-1061/20000单位
商品详细Excellgen/ExcellScript M-MLV(MMLV)逆转录酶RNase H-minus/EG-1061/20000单位
Excellgen/ExcellScript M-MLV(MMLV)逆转录酶RNase H-minus/EG-1061/20000单位
Excellgen/ExcellScript M-MLV(MMLV)逆转录酶RNase H-minus/EG-1061/20000单位
商品编号: EG-1061-20,000Units
品牌: Excellgen
市场价: ¥1000.00
美元价: 450.00
产地: 美国(厂家直采)
公司:
产品分类: 克隆基因
公司分类: Cloned_Genes
联系Q Q: 3392242852
电话号码: 4000-520-616
电子邮箱: info@ebiomall.com
商品介绍
Description

ExCellscriptM-MuLVReverseTranscriptaseRNaseHminusisanRNA-dependentDNApolymerasewithnodetectableRNaseHactivity.ExcellScriptcanbeusedtogeneratefirst-strandCDNAfrompolyAmRNAortotalRNAforuseindownstreamapplicationssuchasRT-PCR,cDNAcloningorlibraryconstructionforRNA-Seq.PointmutationsintheRNaseHdomainincreasetheThermostABIlityoftheenzymeandsupportgreatercDNAyieldoffull-lengthtranscriptsthanwildtypeM-MLVReverseTranscriptase

Applications
  • FirststrandcDNAsynthesisforRT-PCRandreal-timeRT-PCR
  • SynthesisofcDNAforcloningandexpression
  • GenerationoflabeledcDNAprobesformicroarrays
  • DNAlabeling
  • AnalysisofRNAbyprimerextension
SourceArecombinantE.colistraincarryinganengineeredMoloney-MurineLeukemiaVirusReverseTranscriptasegene
UnitDefinition1unitisdefinedastheamountofenzymerequiredtoincorporate1nmolofdTTPintoacidinsolublematerialin10minutesat37°Cusingpolyr(A)/oligo(dT)asasubstrate.
Components
  • M-MuLVReverseTranscriptase:200units/µLin50mMTris-HCl,150mMNaCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,0.1%NP-40,50%glycerol,pH7.6@25°C
  • 10XReactionBuffer:500mMTris-HCl,750mMKCl,30mMMgCl2,100mMDTTpH8.3@25°C
StorageCondition-20°C
Protocol
  1. PrimerAnnealing:CombinethefollowinginanRNase-freereactionvessel:
AmountDescriptionFinalConcentration
1µL25mMdNTPSolution(N2050L2.0mM
XµL1ng-2µgTotalRNA-or-
XµL5-500ngmRNA(polyAselected)
1µLOligo(dT)12-18(500µg/ml)-or-40µg/mL
1µLRandomPrimers(125µg/ml)-or10µg/mL
1µLGSPPrimer(2pmol)165µM
XµLSterileWaterN/A
10µLTotalVolume
  1. Heatreactionfor5minutesat65°C.Spinbriefly(5sec)topulldowncondensateandplaceimmediatelyonice.
  2. Add1µL10XM-MuLVRTBufferandDNase-freewatertoafinalvolumeof10µLperreaction.
  3. Incubate:
    • IfusingOligo(dT)orGSPprimers:2minutes@42°C
    • IfusingRandomprimers:2minutes@25°C
  4. Add1µL(200units)M-MuLVReverseTranscriptaseandmixbygentlypipettingsample.(Note:ifusingrandomprimers,pre-incubatereaction@25°Cfor10minutes).
  5. Incubateat42°Cfor45-60minutes.
  6. Inactivateenzymeat85°Cfor10minutes.
  7. Storeproductsat-20°Corproceedtonextstep.
品牌介绍
ExcelGene是一家私人拥有和科学驱动的公司,由Florian M.Wurm教授于2001年创建,自2017年起由首席执行官Maria João Wurm博士领导。我们的总部设在瑞士的蒙蒂。F、 Wurm是旧金山南部基因科技公司(Genentech Inc.)的前经理和科学家,也是为第一批在CHO细胞中制造药物蛋白质而开发制造工艺的先驱科学家之一。Maria J.De Jesus,现在的Maria J.Wurm,ExcellGene的共同创始科学家,在位于洛桑的瑞士联邦理工学院(EPFL)担任高级科学家,发明并开发了多项突破性技术。这些发明对细胞系的发展产生了深远的影响,有些已经在临床生物制剂的早期研发工作中得到了全球应用。ExcelGene面向全球客户,致力于挑战蛋白质表达目标。